菌阴肺结核:痰涂片及培养均为阴性,但临床表现与影像学高度提示肺结核,IGRA阳性结果可为诊断提供有力支持。
肺外结核:如结核性胸膜炎、腹膜炎、脑膜炎、淋巴结结核、骨关节结核等,因病灶部位难以获取合格标本,IGRA阳性具有重要的参考价值。
肺部病灶鉴别诊断:在肺部肿块、结节的鉴别中,IGRA阳性有助于提高结核病的诊断考虑。
不明原因发热或长期炎症:作为病因筛查的一部分,协助排查结核感染。
此外,在免疫功能正常的患者中,IGRA阴性结果对排除结核感染同样具有重要临床意义,有助于减少不必要的经验性抗结核治疗,优化临床决策。
因此如何正确解读TB-IGRA报告显得尤为重要?
一、什么是γ干扰素释放试验
γ-干扰素释放试验(IGRA)是基于T细胞免疫记忆的体外检测 。IGRA并非直接检测细菌,而是检测人体免疫系统(效应T淋巴细胞)对结核分枝杆菌的“记忆”。当这些“记忆T细胞”再次接触到其特异性抗原时,会被迅速激活,大量分泌γ-干扰素的细胞因子。
二、检测流程
基本流程:抽取患者新鲜全血,将血液分别加入三个不同的培养孔(阴性对照孔、阳性孔、测试孔)中,在体外共同孵育(16-24小时),孵育后,检测各管中IFN-γ的含量。
①阴性对照管(N):仅含培养基。代表本底反应。N值反映的是患者外周血细胞在没有结核特异性抗原刺激下自发产生的IFN-γ水平。
②阳性对照管(P): 加入非特异性有丝分裂原(如植物血凝素),用于检测T细胞的总体反应能力。P值 是“质量控制员”:它保证了整个实验是在患者免疫功能“可检测”的条件下进行的。
③测试管(T): 加入结核特异性抗原(ESAT-6/CFP-10和/或QFT-Plus),这些抗原在卡介苗和大多数环境分枝杆菌中缺失,从而保证了检测的高特异性。T值直接反映了患者免疫系统对结核菌抗原的反应强度。这个值越高,说明反应越强。
三、报告解读及临床意义
1.首先看N值:
N值表示在没有结核特异性抗原刺激下自发产生的IFN-γ水平。N值过高是一个重要的警示信号,结果可能受到干扰,患者可能存在未被发现的全身性免疫激活性疾病,整个报告都会被判定为“不确定”。
2.其次看T-N值和P-N值
T-N值:抗原刺激的净反应值,从抗原孔的反应值中,减去本底(阴性对照)值,得到真正由结核特异性抗原引起的IFN-γ反应值。(T - N) ≥14且N/4(临界值),则结果为阳性(临界值由试剂厂商通过大量临床研究设定)
P-N值:定性地反映患者当前的细胞免疫功能水平。P-N值过低必须低于预设的阈值(20),说明即使用最强的非特异性刺激,患者的T细胞也无法被有效激活,说明患者的整体细胞免疫功能可能处于严重抑制状态。
3.结核分枝杆菌特异性细胞免疫反应:阳性
结果:(T - N) ≥ 阳性临界值
临床意义:
①存在结核特异性免疫应答:表明受检者体内存在针对结核分枝杆菌抗原的特异性T细胞,提示已发生结核感染。
②不能区分感染状态:阳性结果本身无法区分是潜伏性结核感染(LTBI)还是活动性结核病。需结合临床症状、体征、影像学检查(如胸部X线/CT)和病原学结果进行综合判断。
③重要的诊断线索:尤其在菌阴肺结核、肺外结核等难以获得病原学证据的情况下,阳性结果是支持结核病诊断的强有力辅助依据。
4.结核分枝杆菌特异性细胞免疫反应:阴性
结果:(T - N) < 阳性临界值,且阳性对照(P-N)反应正常。
临床意义:
①排除结核感染的可能性高:在免疫功能正常的个体中,阴性结果意味着当前不存在可被检测到的结核特异性T细胞免疫反应,可高度排除结核感染。
②支持非结核诊断:在鉴别诊断中,阴性结果有助于降低结核病的考虑权重,转而寻找其他病因(如普通肺炎、肿瘤、其他感染等)。
5. 结核分枝杆菌特异性细胞免疫反应:结果不确定
结果:(T - N) < 阳性临界值,阳性对照(P-N)反应低于阈值,提示细胞免疫功能受抑。
临床意义:
①提示免疫功能严重抑制:表明患者整体T细胞免疫功能可能处于低下或衰竭状态,常见于晚期HIV/AIDS、接受高强度免疫抑制治疗、严重全身性感染、血液系统恶性肿瘤等情况。
②检测结果无法解释:由于机体无法对任何刺激产生有效的免疫反应,导致无法判断其对结核特异性抗原的真实反应状态。因此,该结果既不能排除也不能诊断结核感染,报告为“不确定”或“无效”。
③重要的临床警示:此结果本身是评估患者免疫功能状态的一个重要信号,临床医生应高度关注其基础疾病或治疗情况,并需通过其他方法(如影像学、病理学、分子检测等)来评估结核病的可能性。
四、TB-IGRA实验的缺陷
1. 不能区分潜伏感染与活动性结核病,阳性结果后,必须结合临床症状和影像学检查来区分是“潜伏”还是“活动”。
2. 阴性结果的排除价值有限, 在免疫功能严重受损者(晚期HIV、免疫抑制剂治疗、重症结核)中,假阴性率高,绝不能凭阴性结果排除结核感染。
3. 不推荐用于疗效监测: 治疗过程中,IGRA值(阳性/阴性、数值高低)的变化与治疗效果无明确、稳定的相关性,不能作为停药或治愈的指标。
4. 5岁以下儿童免疫系统不成熟,敏感性可能不足,常需与TST结合或动态观察。
IGRA是一项基于免疫学原理的功能性检测。它揭示了“感染”的免疫状态,但不能定位“疾病”的临床阶段。精准的临床决策,在于将这份“免疫记忆报告”与患者的临床表现、影像学发现和流行病学史进行整合分析。