背景：血液生物标志物已成为检测阿尔茨海默病(AD)病理的有效工具，为影像学检查和脑脊液(CSF)分析等传统诊断方法提供了微创替代方案。虽然静脉穿刺的操作较影像学和CSF采集简单，但是AD生物标志物的精确处理与储存仍需医务人员指导，限制了其在研究和临床中的大规模应用。DROP-AD项目旨在探讨以毛细血管血制成的干血浆点(DPS)和干血点(DBS)检测AD生物标志物的潜力，包括第217位氨基酸磷酸化tau(p-tau217)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)及神经丝轻链(NfL)。

方法：

①研究人群与样本采集：共纳入337名受试者，来自7个独立研究中心；其中304名同时提供配对样本(毛细血管来源的DPS或DBS与静脉血浆)。毛细血管血以指尖采血获得，制备DPS与DBS；静脉血按标准静脉穿刺程序采集，分离血浆后置于-80°C保存，作为对照。

②生物标志物检测：采用单分子阵列(Simoa)技术，分别测定p-tau217、GFAP及NfL浓度；DPS与DBS经洗脱、稀释后上机，静脉血浆直接上机。

③一致性评估：计算DPSp-tau217与静脉血浆p-tau217的Spearman秩相关系数(rS)；对GFAP与NfL，分别计算DBS或DPS与静脉血浆的Spearman秩相关系数。

④诊断效能与疾病分级：以CSF Aβ42/40比值及p-tau181阈值定义的“CSF生物标志物阳性”为金标准，绘制ROC曲线，获得DPS p-tau217的AUC。依据临床痴呆评定(CDR)总分将受试者分为认知正常(CDR 0)、轻度认知障碍(CDR 0.5)及痴呆(CDR≥1)，比较各组DPS p-tau217水平。

⑤唐氏综合征亚组：单独招募DS受试者，分为无症状(CDR 0)与痴呆(CDR≥1)两组，测定DPS/DBS生物标志物。

⑥无监督采集：部分受试者在家中自行完成指尖采血(无医务人员在场)，邮寄回实验室；与同一受试者由研究人员监督采集的样本进行配对比较，计算组内相关系数(ICC)。

结果：

①相关性：DPS p-tau217与静脉血浆p-tau217的rS=0.74(95% CI 0.68–0.79，P<0.001)；DBS GFAP与静脉血浆GFAP的rS=0.80(95% CI 0.75–0.84，P<0.001)；DPS NfL与静脉血浆NfL的rS=0.81(95% CI 0.76–0.85，P<0.001)。

②诊断准确性：DPS p-tau217预测CSF生物标志物阳性的AUC为0.864(95%CI 0.810–0.918)；最佳截断值对应灵敏度82%、特异度78%。

③疾病严重程度梯度：认知正常组DPS p-tau217中位数0.28pg/mL(IQR 0.19–0.40)；轻度认知障碍组0.45pg/mL(IQR 0.30–0.68)；痴呆组0.92pg/mL(IQR 0.61–1.37)；Kruskal-Wallis检验P<0.001，每两组间Mann-Whitney U检验P<0.01。

④唐氏综合征人群：无症状DS受试者DPS p-tau217中位数0.36pg/mL(IQR 0.25–0.52)；

DS痴呆患者1.15pg/mL(IQR 0.83–1.68)，两组差异显著(P<0.001)。DS痴呆患者DBS GFAP与DPS NfL亦显著升高(P<0.01)。

⑤无监督采集：自我采集与监督采集样本的ICC为0.91(95% CI 0.86–0.95)；Bland-Altman分析显示偏差<5%，95%一致性界限内样本比例96%。

结论：跨中心大样本证实，干血浆/干血点可准确替代静脉血检测AD核心标志物：DPS p-tau217与静脉血相关0.74，预测CSF阳性AUC 0.864；DBS GFAP、NfL亦高度相关。唐氏综合征人群及自采样本均获一致结果，证明微创、可邮寄策略适用于大规模筛查，然而，尚需进一步完善采集与分析方案，方能使该方法在临床实践中具备可行性与实用性。