HSV的感染分为原发性感染、潜伏性感染与复发感染。原发性感染即人在感染HSV后,该病毒在感染的组织及其周围增殖并形成病灶,随后病毒通过神经细胞轴突向感觉神经节传递形成潜伏性感染;当受到某些非异特性因素刺激或机体免疫力下降,病毒再次激活,导致感染性病毒的释放,即可引起HSV的复发感染。
HSV-1感染主要引起口、面部、咽部感染,严重者可表现为散发性脑炎等重大疾病,也可导致原发性生殖器感染,且近年来感染比例正在增加;HSV-2主要通过性接触导致生殖器疱疹;HSV-1和HSV-2也可通过垂直传播导致新生儿疱疹,是生殖器HSV感染最严重的后果。由于HSV 感染无法通过临床表现准确诊断,因此应对所有疑似 HSV 感染进行实验室诊断,明确病原体感染。
一、单纯疱疹病毒感染实验室检测方法
1、核酸检测
核酸检测(比如PCR方法)灵敏度高、特异性好,可快速、高通量检测,是目前临床病原体检测的首选方法。阳性结果是判断特定病原体急性感染最直接的证据,由于原发感染和复发感染均可检测到病原体存在,所以样本中检测出病原体不能区分原发感染和复发感染。
02、病毒分离培养
病毒分离培养作为传统病原学检测的“金标准”,采用原代人胚细胞、人二倍体成纤维细胞或水貂肺细胞分离HSV,并密切观察细胞病变效应(CPE)。HSV分离株的鉴定和分型还需结合免疫学方法进行进一步确认。病毒分离培养检测成本高、费时、费力、周期长,且对实验室及操作人员要求较高,临床应用较少。
03、血清学检测
①特异性IgM抗体:IgM抗体阳性,提示患者可能处于急性感染期。初次感染期间,IgM抗体滴度一般在1-2个月内急剧上升,大约3-6个月转阴。原发感染和复发感染均能产生IgM抗体,因此仅IgM抗体阳性检测结果不能区分原发感染和复发感染。
②特异性IgG抗体:IgG抗体的临床价值主要在于其抗体滴度的变化。在疑似感染期两次取样(间隔2-3周),如果第2次检测较第1次检测的滴度有显著增加,提示感染,但需要临床结合多指标进行综合判断。
二、单纯疱疹病毒感染的实验室诊断路径
首选方法:核酸检测
核酸检测可快速、准确确定病原体感染类型。根据感染部位可采集不同的标本类型类进行检测。如:
①皮肤粘膜感染(口唇疱疹、生殖器疱疹等)可采集疱疹液、拭子、刮取物等进行检测,阳性结果提示感染。
②中枢神经系统感染采集脑脊液进行检测,阳性结果提示感染。
③新生儿HSV感染需采集脑脊液+血清+皮损(疱疹液、拭子)进行检测,多部位采集送检,阳性结果提示感染。
次选方法:特异性抗体检测
特异性抗体检测包括:HSV IgM和HSV IgG。IgM抗体阳性,提示患者存在近期感染;但不能区分原发感染和复发感染。IgG抗体阳性,提示患者处于既往感染或潜伏感染。主要用于以下场景:
①孕妇筛查:在孕早期或首次产检时,评估孕妇感染状态,评估感染风险,制定分娩计划。
②原发性生殖道感染:若皮损不典型、已结痂、反复发作或核酸检测阴性仍高度怀疑,可采集第2周和第6周血清进行检测,判断是否发生血清转变。
③评估不典型症状人群的既往感染史。
参考文献:
[1].王兰兰,石运莹(2023)医学检验项目选择与临床应用(第3版),北京 人民卫生出版社.
[2].朱宇宁,尚世强等,TORCH实验室规范化检测与临床应用专家共识[J],中华检验医学杂志,2020,43(5):553-561.