单位 | 沧州市中心医院
前 言
多发性骨髓瘤（MM）是一种起源于前B细胞的骨髓内浆细胞异常增生的血液系统恶性肿瘤。MM目前已经成为了仅次于淋巴癌的第二大血液系统恶性肿瘤（占所有恶性肿瘤的1%~ 2%）。MM常伴有单克隆异常免疫球蛋白增多，这要求实验室检测结果必须准确无误。免疫球蛋白检测是多发性骨髓瘤疾病诊断过程中极其重要的一项检测。本文针对一例多发性骨髓瘤患者在做免疫球蛋白检查时引发的异常结果报告，按图索骥、抽丝剥茧，最终“真相大白”。
案例经过
某日笔者在审核生化结果的时候发现一例异常结果。一患者行免疫球蛋白检测。该样本在检测时生化仪器报警提示IgA为16.1＞Test。
于是笔者赶快检查仪器状况和样本状态。发现当天机器运行良好，IgA质控在控，样本无溶血无黄疸。于是笔者查询患者其它结果，发现患者生化结果显示球蛋白为66.5g/L（如图1），远远大于目前的免疫球蛋白检测结果。
图1 患者的生化结果
笔者又打开患者的病例去寻找蛛丝马迹。患者，男，78岁。临床诊断多发性骨髓瘤（IgA κ型）3年余。在查看患者两个月前的免疫球蛋白结果：IgA为22g/L。
看到这里笔者确定患者无疑是一个IgA κ型多发性骨髓瘤患者那IgA升高也无可厚非。但机器为何会报警呢？于是笔者用生理盐水将患者血清进行1:4稀释。结果显示IgA为9.78（乘以稀释比后为39.12）仍然报警大于TEST如图2。
图2 患者两次IgA结果
笔者似乎遇到了一个劲敌。笔者再次用生理盐水对样本进行了1:5（总共20倍）稀释。这次机器再也没有报警。这次显示IgA为2.2，然后乘以稀释倍数20，最后将IgA为44g/L报给临床。如图3
图3 患者最终的免疫球蛋白结果
案例分析
从最终结果可以看到患者IgA明显升高，而IgM和IgG确是降低的。分析检测原理：查看我院免疫球蛋白检测试剂说明书。检测原理为免疫透射比浊终点法：使用羊抗人IgA抗体和待检血液样本中的IgA进行抗原-抗体反应，反应完成后，用透射比浊检测吸光度的变化反映IgA浓度。
但是说明书中提到结果解释时：“标本IgA≥50g/L时，其检测结果出现前带现象（钩状效应）”。虽然本案例中患者的IgA经过稀释后结果为44g/L，并没有达到说明书中的50g/L。但是首先患者的样本经历了笔者两次稀释，不排除误差增大，其次44g/L已经很接近样本说明书中的50g/L了。说明本案例中的样本IgA检测存在着钩状效应。
知识拓展
什么是钩状效应（hook effect）呢？当我们使用双抗体夹心法进行免疫检测时，分析物的浓度在一定的浓度范围内与检测的信号值呈正比；然而，当分析物的浓度超出一定浓度界限后，信号值反而随着分析物浓度的增高而下降。因为浓度与信号值的整条曲线形似钩子，所以称作钩状效应。如图4。
图4 钩状效应示意图
从图4中可见抗原抗体分子比例合适的范围是曲线的高峰部分，这一部分称为抗原抗体反应的等价带（zone of equivalence）。在抗原抗体反应的等价带，抗原和抗体能够充分结合，形成的沉淀物也最多，抗原与抗体浓度的比例最为合适，因此在这一区域中抗原与抗体的比也称为最适比（optimalratio）。
在zone of equivalence前因为抗体过剩会影响沉淀物的形成，这种现象称前带（prezone）。同理在zone of equivalence后因为抗原过剩，也会影响沉淀物的形成，这种现象称为后带（postzone）。
正是因为有前带和后带这种现象，所以在临床免疫检测当中，一定要引起检验人员的注意。
总 结
实验室检查对于患者确诊至关重要，这要求实验室检测结果必须准确无误。从实验人员角度，审核检测结果时要知其然并知其所以然，防止因钩状效应错误结果误导临床的诊治。从试剂和仪器厂家角度，有必要提前设置预警机制，怀疑有钩状效应干扰发生时及时报警，有助于实验人员更高效准确的处理异常结果。
【参考文献】
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