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有关甘油三酯的检验分析

2023-03-13 11:21:33来源:检验医学

前   言

我们在日常检验工作中会碰到各种各样的问题,需要我们利用自己所掌握的知识和自己的工作经验来解决问题。

案例经过

2018年的12月23号,正常开机,先做钾钠氯离子定标,顺利通过,接着做生化室内质控,十五分钟后,质控结果出来了。40项质控中,只有TG不在控,其它39项质控均在控。质控结果如图1、图2所示:

 

图1

 

图2

从图1、图2中我们可以看出TG的Q1为4.82,是正常值2.20的2倍多,TG的Q2为3.81,是正常值1.00的3倍多,Q1和Q2均失控且远远超过3S失控线。

我们用的是西门子ADVIA2400仪器,试剂是中生北控的试剂,质控是伯乐不定值质控,定标品是中生北控复合定标品。2400仪器没问题,质控品是和昨天同一批复溶分装的,也没问题。难道是TG试剂出了问题,于是重新更换TG试剂重新做质控。

更换试剂后,结果如图3、图4所示:

 

图3

 

图4

Q1为5.02,Q2为4.20还是失控,没办法只能重新定标。重新定标,重做质控结果如图5、图6所示:

 

图5

 

图6

Q1为2.19,Q2为1.02均在控,完美,可以正常做标本了。嘿嘿!随后我在审核标本结果时,又发现问题了。一开始TG的结果没问题,一切正常,但是随着做标本的数量增多时间的推移,TG结果偏低,连续好几个标本均低于正常参考范围,再后来竟为负值。

哎,刚定完标做质控在控,做标本也没问题呀!于是,我又尝试重新定标,再做质控。质控结果如图7、图8所示:

 

图7

 

图8

Q1为2.23,Q2为1.01均在控。我怀着忐忑的心,接着做今天的标本。审核标本时,又出现同样的问题。

案例分析

我真的蒙了,欲哭无泪,只能再找原因。我想到底哪儿出了问题呢?为什么?重新定标时质控在控,但随着做的标本数量增多,TG测定越来越低,别的检测项目却不受影响呢?百思不得其解。当时重新定标后光顾着看质控结果了,质控在控,就急着做当天的标本,没看TG的定标曲线。这时才想起看TG的定标曲线。第一次定标曲线如图9所示:

 

图9

重新定标后的定标曲线如图10所示:

 

图10

而正常的TG定标曲线如图11所示:

 

图11

各位大侠们,图9、10和11三条定标曲线有什么不同?这得从TG测定原理上解释。我科用的是中生北控的试剂,该TG测定方法为GPO-PAP法,其检验原理如下:

用脂蛋白脂酶(LPL)使血清中TG水解为甘油和脂肪酸,将生成的甘油用甘油激酶(GK)及三磷酸腺苷(ATP)磷酸化,以磷酸甘油氧化酶(GPO)氧化3-磷酸甘油,产生磷酸二羟丙酮和过氧化氢(H2O2)。H2O2再经过氧化酶(POD),4-氨基安替吡啉(4-AAP)与4-氯氛(三者合称PAP)反应,生成红色醌亚胺色素。醌亚胺的最大吸收峰在500nm左右,吸光度与标本中甘油三酯的含量成正比。

这时我突然想起昨天晚上,工程师更换了纯水机滤芯,没有彻底反复冲洗,导致制出的纯水中混有滤芯本身吸附的游离的甘油,从而导致TG的测定值(标本中TG水解的甘油和纯水机制出水混入的甘油)高于标本的实际测量值。

到此为止迷雾解开:是实验室纯水机制出的水中混入了甘油,随着用水时间的推移,甘油含量逐渐降低造成的。反映到定标曲线上,随着时间的推移,定标曲线的BLK从(图9)0.3562递减到(图10)0.1951,而正常定标曲线的BLK为0.0455,这样一来正好与定标曲线相符合。

随着检测标本的增多,时间的推移,纯水机制出的水中甘油浓度逐渐降低,若仍用原来的定标曲线来计算标本的TG含量,就会出现TG逐渐偏低,甚至为0或者负数。把纯水机中的水全部放掉,反复冲洗滤芯,重新定标,TG定标曲线恢复正常,TG质控均在控,测定数值与患者临床相符。

这是一个由于纯水机更换滤芯引起TG测量结果异常的一个案例。无独有偶,2020年10月份的一天,也发生了一起类似的事件。早上开机时质控均在控,患者标本也一切如常,可是下午审核标本中,发现好多标本的TG均超过10mmol/L,但是每个标本都不乳糜。

经过上面案例的分析,相信大家已经明白了,也是纯水机更换滤芯出了问题。原来工程师利用中午大家休息时更换纯水机的滤芯,又没有彻底冲洗造成的。下午的标本的TG用原来定标曲线计算,就造成测定值高于实际值。这正好又验证了(图1-4)所示质控结果都偏高的现象。

总   结

全自动生化分析仪是具有微机控制、机电、光学一体化的仪器,由计算机、电极、试剂、比色、样品输送、管路清洗等系统组成。其中管路清洗系统主要是在每做完一个测试项后,利用纯水对生化仪的加样针、 试剂针和反应槽以及所有与其连接的管路进行冲洗和清洗,以确保下一个测试项的准确度,因此纯水在全自动生化仪中起到很重要的作用。纯水是由实验室纯水系统提供。

供水质量也会影响实验结果的准确性。为了保证实验室纯水系统的供水质量,要制定维护保养制度,定期维护保养。每次维护保养后,尤其是更换滤芯后,要反复冲洗方可使用。我们在日常工作中,不仅要看质控结果,还要学会看定标曲线和生化反应曲线。因为从定标曲线和反应曲线上,可以提供我们好多信息。

 

参考文献:

[1]王勤富等:上海医学检验杂志,6(4)218,1991

[2]刘长水等:仪器原理与使用,25(10)27,2010

来源:检验医学https://mp.weixin.qq.com/s/lotmakP6tcYclsMvVzXsLw