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 疑难重重的鉴定路——罕见的ABO亚型一例

2021-08-25 15:49:42来源:检验医学
前  言

血型是指血液中各种成分的遗传多态性标志。血型包括红细胞血型、白细胞血型、血小板血型等。一般专指红细胞表面的抗原差异,即红细胞血型。在临床试验中,ABO血型系统是最为重要的血型系统。亚型是指属同一血型抗原,但抗原结构和或抗原位点数有一定差异所引起的变化。在临床工作中ABO亚型属于“疑难血型”鉴定,是检验实验室检测能力和水平的重要方式。

下面案例是笔者在实际工作中遇到的一例罕见的ABO亚型。

案例经过

患者,男,34岁,主诉反复肛周肿物突出半年,加重伴出血1周,拟行环状痔切+痔结扎术。

手术前相关实验室检查结果,如下图1~4所示

图1 血常规

 

图2 生化

图3 凝血

图4 传染性疾病

 

手术前ABO血型鉴定,血清学反应格局如下(表1,图5~8所示)

表1

 

图5

图6

图7

图8

ABO血型鉴定出现微柱凝胶法与试管法结果不一致,微柱凝胶法为B型,试管法正定型为“AB”型,反定型为B型,试管法正、反定型不一致。

为排除人为因素或操作失误,笔者重新对标本进行检测。检测结果和前面一样。

那么问题来了:

1. 正定型微柱凝胶法与试管法为什么不一致?

2. 微柱凝胶法正反定型一致的情况下是否依旧存在漏检的可能?

3. 患者到底是什么血型呢,AB?、B?、亚型?

带着这些疑问,笔者对案例作进一步分析

案例分析

一方面,为排除可能人为因素和试剂、仪器的影响;笔者要求临床重新采集患者标本两管(1支抗凝管,1支干燥管)送检,标本状态正常、无溶血,脂浊等,血清分离比例正常,镜下未见红细胞呈缗钱状排列;在确保所使用的试剂、仪器均在控状态后,按照SOP规程操作,分别采用微柱凝胶法和试管法对样本进行血型鉴定,检测结果和之前一模一样,血清反应格局如表1所示,该血型为“凝难血型”鉴定。

另一方面,为了解患者的病史,笔者查阅了其病历。患者男,34岁,既往体健,无糖尿病和慢性支气管炎、甲亢等慢性疾病史,无家族遗传病史,无不良用药史、无输血史和手术史,生活较规律,如图9所示。

图9

结合实验室相关检查结果(图1~4),可以排除因疾病或药物原因导致的抗原抗体减弱,基本判断该案例是ABO亚型。

为确定患者血型,笔者进一步作ABO血型血清学鉴定,血清学反应格局结果如表2所示。

表2

 

根据ABO亚型的血清学反应特征鉴定为:B(A)亚型

至此,回到前面提到的问题,便真相大白!

1、正定型微柱凝胶法与试管法鉴定结果为什么不一致?

主要原因是:一方面因为方法学不同,检测的敏感度不一样,另一方面与试剂厂家抗体的来源有关,经与相关厂商技术人员沟通,微柱卡中的抗-A,抗-B是非人源性单克隆抗体,试管法所用的抗-A,抗-B是人源性单克隆抗体,B(A)亚型与人源性单克隆抗体抗-A亲和力更强有关。

2、微柱凝胶法正反定型一致的情况下是否依旧存在漏检的可能?

本案例中微柱凝胶法检测正反定型一致均为B型,实事上为B(A)亚型,存在漏检的潜在风险。但根据《临床输血技术规范》要求,血型鉴定只要求进行正反定型检测,没有要求进行亚型鉴定,所以从法律角度上讲不存在漏检一说。

3、患者到底是什么血型呢?

通过上述分析,血型血清学检测,该患者即不是B型,也不是AB型,而是B(A)亚型,一种比较罕见的ABO亚型。

知识拓展

B(A)亚型及血清学特征

B(A)亚型是一种罕见的ABO亚型,最早由Yamamoto等在1956年发现,其分子机制为B等位基因在正常B基因序列的基础上发生单碱基突变,使其具有编码双功能活性酶的能力。B(A)亚型在血清学检测中除表现B抗原特异性外,还表现少量A抗原特异性,从而干扰血型鉴定及配血工作。B(A)型如误定为AB型,输入AB型红细胞可引起溶血性输血反应。国内已报道7个等位基因。

B(A)亚型的血清学特征如表3所示

表3

?表示凝集强度存在不确定性 

疑难血型是指一种血型难以检定或判定的“现象”,本身不是一种独立血型。

疑难血型的鉴定有时与实验室条件、水平、经验有关。

ABO疑难血型:绝大多数因为正反定型不一合而发现,少数因为与以前定型不一致、输血反应、无效输血、不合遗传规律等而发现。

发现ABO正反定型不一致,必须进一步检查,但不是要强求做到正反定型一致,而是要对ABO正反定型不一致作出科学解释。

必须指出:只有用手工法,即试管法,才能鉴定疑难血型,微柱凝胶卡,自动化机器,不能鉴定疑难血型。

ABO疑难血型八条提示,避免误定、漏检。

1、与以前定型不一致

2、抗-AB,与抗-A,或抗-B凝集强度“不平行”,如:抗-AB凝集4+,抗-A,或抗-B凝集1+

3、正定型,或反定型出现混合凝集(MF)

4、抗-A,或抗-B凝集弱,试剂效价>128,凝集<2+

5、ABO正反定型不合

6、ABO同型配血不合

7、ABO同型输血,发生溶血性输血反应,或红细胞无效输血

8、ABO血型不符合遗传规律

总  结

到此,真相水落石出,患者的血型即不是B型,也不是AB型,而是B(A)亚型。B(A)血型是ABO血型中较为罕见的一种亚型,该案例之所以被发现,是笔者科室血型鉴定要求采用两种不同的方法检测,如果只用微柱凝胶法,虽然正反定型一致仍然没能有效检出,存在漏检的风险,因此不要过于轻信某一厂家或某一方法学的结果。

有条件的实验室,建议采用不同厂家、不同方法学进行相应验证。再者,在临床工作中,要有高度的责任心,在结果的判读时要认真、细致,对有疑问的结果多问个为什么,尤其是弱凝集的标本,避免漏检误检。

参考文献

[1]兰炯采,陈静娴,马红丽,等.推荐AB0疑难血型三步分析法.中国输血杂志,20lO,23(3):165-168.

[2]梁路石,史丽莉,芦慧霞,等.1例罕见的B(A)亚型的鉴定.临床检验杂志,2018,36(12):953-954.

[3]李喜喜,谭斌,张群,等.ABO 亚型B(A)的鉴定及其分子机制研究.国际输血及血液学杂志,2020,43(4):357-361.

[4]王超,李素萍,吴学忠,等.B(A)血型的鉴定及其患者输血的探讨.中国实验血液学杂志 2015;23(4):1147-1151.